ELISA實驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。選擇試劑時，應(yīng)選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。

ELISA加樣步驟的常見問題：
    ①：過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)；
    ②：手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間；
    ③：加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。.血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣。
 

對應(yīng)解決方法：
    ①：標(biāo)本為血清，將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
    ②：加樣后及時放入孵箱。
    ③：加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
    ④：如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
    ⑤：標(biāo)本較多時，請分批操作。
               
        ELISA試劑盒在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。